测抗体宣传

1. 如何测定抗体

在《抗体工程》上有亲和力常数的测定方法，如平衡透析、竞争结合、荧光增强内法、硫氰酸盐洗容脱法、ELISA和固相放射免疫测定法（SPRIA）等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的检测方法。通常采用竞争结合以及Scatchard作图法。如果有条件用SPR方法，这是目前国际上流行的方法，该方法灵敏，客观。

另外测亲和力之前最好先测定抗体的有效浓度，方法是夹心法，用标准免疫球蛋白做标准品。因为在作OD-抗体浓度曲线时如果抗体浓度不够，做不出来好的S形曲线，达不到最高值。所以建议你先测定抗体的浓度。如果浓度较低的话，你可以浓缩一下，方法很多，如PEG法，真空冷冻干燥，超速离心等等。

2. 为什么要进行抗体水平监测

抗体水平监测是猪群监测工作中的一项重要内容。近年来，我国猪群中出现免疫失败的现象越来越多，即猪场接种疫苗后仍然发病，如打过猪瘟疫苗以后，还没有超过疫苗的免疫保护期猪群就发生猪瘟，其主要原因就在于忽视接种疫苗以后的免疫抗体监测。

（1）在正常情况下，猪注射疫苗以后，一般都会产生较好的免疫保护效果，但由于各个猪场猪群的具体情况千差万别，而且疫苗本身质量和运输、保存、使用等各个环节都会直接影响疫苗的免疫效果。加上我国养殖环境较差，猪病种类繁多，疫情复杂，一旦猪群出现免疫漏洞，猪就很容易感染发病。此外，当猪场感染了圆环病毒、猪蓝耳病病毒等病原时，往往会造成感染猪尤其是仔猪的免疫抑制，致使疫苗免疫效果大打折扣。在这种情况下，猪群接种疫苗以后并不能阻止猪群发病。

（2）为了避免免疫失败，猪场在接种疫苗后，应该及时采集血液样本（一般在接种疫苗以后3～4周进行），分离血清进行免疫抗体水平监测，从而验证接种疫苗以后是否确实产生了理想的免疫保护效果。抗体水平的高低凭肉眼观察是看不出来的，必须把样品送到有条件的实验室进行化验。

（3）通过免疫抗体监测，可以综合评价疫苗产品的质量、免疫程序是否合理、免疫注射方法是否正确无误、疫苗的免疫效果和猪群的健康状况（如是否存在隐性感染猪）等诸多方面，发现猪群免疫接种过程中出现的漏免、免疫失败等问题并及时采取补救措施。通过二次血清的检测，还可以准确判定猪群是否感染疾病。

（4）目前，部分大型规模化养殖场已经建立了疫苗免疫抗体监测制度，但大多数养猪场仍未将免疫抗体监测纳入猪场的疾病预防体系中，这是十分危险的。建议所有养猪场经营者转变思想观念，对免疫抗体监测予以足够的重视，并在此基础上建立科学合理的个性化免疫程序，结合其他兽医防疫措施，减少和杜绝免疫失败的发生。

3. 抗体检测的临床应用

首先抗体检测用于诊断时，要考虑到患者所在地区该疾病的发病情况内及与该疾病密切相关的情况容，如正常人血清中抗体的水平，这一点在病原微生物感染的疾病中尤为重要。有些感染性疾病(例如病毒感染性疾病)，往往采用“双份血清法”，根据发病初期及患病后某个时期抗体增长的情况进行诊断。
众所周知，许多感性疾病初期，机体产生的是IgM型抗体，此后才产生IgG型抗体，因此在条件许可的情况下，有合格的试剂盒供应时，建议尽可能在患病初期进行IgM型抗体检测，有助于早期诊断。

4. 测抗体的效价的意义

1.测定抗体是了解机体有否对入侵抗原产生免疫！
2.抗体含量越高，机体对某种抗原免疫专能力越强！
3.含量越低，则属免疫相对前者而减低！
4.若无则对其入侵抗原暂无免疫力!(有几种可能1.抗体未入侵 2.免疫缺陷)
5.带菌者或带毒者机体抗原抗体处于一个比较恒定的状态，但体内确实有微生物入侵，但是却无临床表现！（此时可通过检查抗体变化了解机体感染情况）。

5. 检测抗体需要些什么

ELISA检测对于上面提出的一般都可以做了。。起码比其他技术简单快捷。。也可用金标快速检测卡。。

6. 如何检测体内是否存在抗体

1. HBsAg (乙肝表面抗原)
原理：采用ELISA 双抗体夹心法。双抗体夹心法用于检测相对分子质量较大的蛋白质抗原。先将已知特异性抗体包被于固相载体上，加待测样本，若 其中有相应的抗原，则抗原和抗体特异性结合洗板后加入酶标记特异性抗体，使在固相上形成包被抗原抗体复合物洗板:加酶底物及色原呈色。双抗原夹心法则是利用包被抗原和标记抗原检测样本中的特异性抗体。抗原或抗 体水平与所测吸光度(A) 值呈正相关。
将纯化的抗HBs包被固相载体，加入待测样品，括其中含有HBsAg ，则与载体上的抗HBs 结合，再加入辣根过氧化物酶( HRP) 标记的抗HBs 抗体，加酶底物/色原显色。显色程度与 HBsAg 含量成正比。
2.HBsAb （乙肝表面抗体）
原理：采用ELISA 双抗原夹心法。反应板上包被纯化HBsAg ，待测样品中抗HBs与之反应，再加HRP-HBsAg 形成夹心，加酶底物/色原悔液显色。
3.HBeAg 和HbeAb
原理：检测HBeAg 和抗HBe 分别用ELISA 双抗体夹心法和Elisa竞争法。
4.HbcAb
原理：Elisa竞争法。用于检测待检样本中未知抗原或抗体。测抗原时用已知抗体包被固相载体，然后同步加入含有待测抗原的样本和酶标记抗原，使待测抗原与酶标记抗原竞争结合在固相载体上的抗体；洗板加酶底物及色原!让包。待iYlIJ 悔液抗原量越多，则被结合的酶标记抗原量越少，呈色越浅。呈色深浅与待测抗原的量成反比。测未知抗体时用已知抗原包被固相载体，同步加入含有待测抗体的标本和酶标记特异抗体，二者竞争结合固相载体t
的抗原.待测抗体量越多，酶标记抗体与固相抗原结合的最就越少，呈色就越浅。待测抗体的水平与呈色程度成反比。

7. 抗体检测的意义

一般来说，诊断感抄染性疾病，袭如能从标本中直接检测到病原体是最理想的，但由于某些病原体生长所需条件高，生长时间长、检出的阳性率低，给临床诊断带来一定困难。特异性抗体的检出在一定程度上可弥补以上的不足。近年来逐步发展起来的用免疫学方法测定标本中的病原抗原，或用分子生物学技术测定感染因子，无疑对感染性疾病的早期诊断是一个巨大的进步。尽管如此，也还不能完全代替特异性抗体的检测，如人类免疫缺陷病毒(HIV)，测定其抗体仍是诊断艾滋病的重要依据。