測抗體宣傳

1. 如何測定抗體

在《抗體工程》上有親和力常數的測定方法，如平衡透析、競爭結合、熒光增強內法、硫氰酸鹽洗容脫法、ELISA和固相放射免疫測定法（SPRIA）等。其中ELISA和SPRIA是最敏感的檢測方法。通常採用競爭結合以及Scatchard作圖法。如果有條件用SPR方法，這是目前國際上流行的方法，該方法靈敏，客觀。

另外測親和力之前最好先測定抗體的有效濃度，方法是夾心法，用標准免疫球蛋白做標准品。因為在作OD-抗體濃度曲線時如果抗體濃度不夠，做不出來好的S形曲線，達不到最高值。所以建議你先測定抗體的濃度。如果濃度較低的話，你可以濃縮一下，方法很多，如PEG法，真空冷凍乾燥，超速離心等等。

2. 為什麼要進行抗體水平監測

抗體水平監測是豬群監測工作中的一項重要內容。近年來，我國豬群中出現免疫失敗的現象越來越多，即豬場接種疫苗後仍然發病，如打過豬瘟疫苗以後，還沒有超過疫苗的免疫保護期豬群就發生豬瘟，其主要原因就在於忽視接種疫苗以後的免疫抗體監測。

（1）在正常情況下，豬注射疫苗以後，一般都會產生較好的免疫保護效果，但由於各個豬場豬群的具體情況千差萬別，而且疫苗本身質量和運輸、保存、使用等各個環節都會直接影響疫苗的免疫效果。加上我國養殖環境較差，豬病種類繁多，疫情復雜，一旦豬群出現免疫漏洞，豬就很容易感染發病。此外，當豬場感染了圓環病毒、豬藍耳病病毒等病原時，往往會造成感染豬尤其是仔豬的免疫抑制，致使疫苗免疫效果大打折扣。在這種情況下，豬群接種疫苗以後並不能阻止豬群發病。

（2）為了避免免疫失敗，豬場在接種疫苗後，應該及時採集血液樣本（一般在接種疫苗以後3～4周進行），分離血清進行免疫抗體水平監測，從而驗證接種疫苗以後是否確實產生了理想的免疫保護效果。抗體水平的高低憑肉眼觀察是看不出來的，必須把樣品送到有條件的實驗室進行化驗。

（3）通過免疫抗體監測，可以綜合評價疫苗產品的質量、免疫程序是否合理、免疫注射方法是否正確無誤、疫苗的免疫效果和豬群的健康狀況（如是否存在隱性感染豬）等諸多方面，發現豬群免疫接種過程中出現的漏免、免疫失敗等問題並及時採取補救措施。通過二次血清的檢測，還可以准確判定豬群是否感染疾病。

（4）目前，部分大型規模化養殖場已經建立了疫苗免疫抗體監測制度，但大多數養豬場仍未將免疫抗體監測納入豬場的疾病預防體系中，這是十分危險的。建議所有養豬場經營者轉變思想觀念，對免疫抗體監測予以足夠的重視，並在此基礎上建立科學合理的個性化免疫程序，結合其他獸醫防疫措施，減少和杜絕免疫失敗的發生。

3. 抗體檢測的臨床應用

首先抗體檢測用於診斷時，要考慮到患者所在地區該疾病的發病情況內及與該疾病密切相關的情況容，如正常人血清中抗體的水平，這一點在病原微生物感染的疾病中尤為重要。有些感染性疾病(例如病毒感染性疾病)，往往採用「雙份血清法」，根據發病初期及患病後某個時期抗體增長的情況進行診斷。
眾所周知，許多感性疾病初期，機體產生的是IgM型抗體，此後才產生IgG型抗體，因此在條件許可的情況下，有合格的試劑盒供應時，建議盡可能在患病初期進行IgM型抗體檢測，有助於早期診斷。

4. 測抗體的效價的意義

1.測定抗體是了解機體有否對入侵抗原產生免疫！
2.抗體含量越高，機體對某種抗原免疫專能力越強！
3.含量越低，則屬免疫相對前者而減低！
4.若無則對其入侵抗原暫無免疫力!(有幾種可能1.抗體未入侵 2.免疫缺陷)
5.帶菌者或帶毒者機體抗原抗體處於一個比較恆定的狀態，但體內確實有微生物入侵，但是卻無臨床表現！（此時可通過檢查抗體變化了解機體感染情況）。

5. 檢測抗體需要些什麼

ELISA檢測對於上面提出的一般都可以做了。。起碼比其他技術簡單快捷。。也可用金標快速檢測卡。。

6. 如何檢測體內是否存在抗體

1. HBsAg (乙肝表面抗原)
原理：採用ELISA 雙抗體夾心法。雙抗體夾心法用於檢測相對分子質量較大的蛋白質抗原。先將已知特異性抗體包被於固相載體上，加待測樣本，若 其中有相應的抗原，則抗原和抗體特異性結合洗板後加入酶標記特異性抗體，使在固相上形成包被抗原抗體復合物洗板:加酶底物及色原呈色。雙抗原夾心法則是利用包被抗原和標記抗原檢測樣本中的特異性抗體。抗原或抗 體水平與所測吸光度(A) 值呈正相關。
將純化的抗HBs包被固相載體，加入待測樣品，括其中含有HBsAg ，則與載體上的抗HBs 結合，再加入辣根過氧化物酶( HRP) 標記的抗HBs 抗體，加酶底物/色原顯色。顯色程度與 HBsAg 含量成正比。
2.HBsAb （乙肝表面抗體）
原理：採用ELISA 雙抗原夾心法。反應板上包被純化HBsAg ，待測樣品中抗HBs與之反應，再加HRP-HBsAg 形成夾心，加酶底物/色原悔液顯色。
3.HBeAg 和HbeAb
原理：檢測HBeAg 和抗HBe 分別用ELISA 雙抗體夾心法和Elisa競爭法。
4.HbcAb
原理：Elisa競爭法。用於檢測待檢樣本中未知抗原或抗體。測抗原時用已知抗體包被固相載體，然後同步加入含有待測抗原的樣本和酶標記抗原，使待測抗原與酶標記抗原競爭結合在固相載體上的抗體；洗板加酶底物及色原!讓包。待iYlIJ 悔液抗原量越多，則被結合的酶標記抗原量越少，呈色越淺。呈色深淺與待測抗原的量成反比。測未知抗體時用已知抗原包被固相載體，同步加入含有待測抗體的標本和酶標記特異抗體，二者競爭結合固相載體t
的抗原.待測抗體量越多，酶標記抗體與固相抗原結合的最就越少，呈色就越淺。待測抗體的水平與呈色程度成反比。

7. 抗體檢測的意義

一般來說，診斷感抄染性疾病，襲如能從標本中直接檢測到病原體是最理想的，但由於某些病原體生長所需條件高，生長時間長、檢出的陽性率低，給臨床診斷帶來一定困難。特異性抗體的檢出在一定程度上可彌補以上的不足。近年來逐步發展起來的用免疫學方法測定標本中的病原抗原，或用分子生物學技術測定感染因子，無疑對感染性疾病的早期診斷是一個巨大的進步。盡管如此，也還不能完全代替特異性抗體的檢測，如人類免疫缺陷病毒(HIV)，測定其抗體仍是診斷艾滋病的重要依據。